MagBead Buccal Swabs DNA Kit

磁珠法口腔拭子DNA提取試劑盒

目錄號：QYM1006S(5t), QYM1006A(20t), QYM1006B(200t)

產品內容：

產品簡介：

本試劑盒提供了一種簡單、快速、高效的用于口腔拭子基因組DNA提取的方法，可用于提取人類口腔拭子基因組DNA?？谇皇米庸稳〉目谇簧掀ぜ毎诹呀庖号cProteinase K共同作用下徹底裂解，釋放基因組DNA。加入結合液后，DNA大量析出，被磁珠特異性吸附。經漂洗和洗脫，得到純凈的基因組DNA?？芍苯佑糜跍y序、PCR、克隆等下游實驗。

產品特點：

所需組織量少，高效，快速。樣本充分裂解后，僅需30-40min，即可獲得高純度口腔拭子基因組DNA。

單個口腔拭子的DNA得率為1-3ug。

與液體工作站或磁棒法自動磁珠提取系統配套使用，可以簡單、快速地進行大規模提取。

保存條件：

室溫，4℃（磁珠, Proteinase K, RnaseA）

注意事項

1. 口腔拭子DNA含量在不同人類個體、不同采集批次中差異較大。

2. 若buffer SCL中有沉淀，請在60℃水浴中溶解后使用。

3. Proteinase K, RnaseA勿反復凍融?？稍?℃保存1個月。若長期保存請放于-20℃。

操作步驟：

1. 將一個口腔拭子轉移至2ml EP管中，用1ml生理鹽水或PBS充分洗滌。將口腔拭子木桿部分折斷，頭部浸泡在洗滌液中，蓋上管蓋，渦旋混勻20s。棄去口腔拭子。

2. 將含細胞的液體12000rpm 離心1min。棄去上清。

3. 向沉淀中加入400ul buffer SCL，20ul Proteinase K（10mg/ml）。吹打混勻。60℃水浴裂解細胞15min。此時溶液變清亮。裂解細胞后，如吹吸溶液時感覺粘稠，請適當延長裂解時間。

4. 向組織裂解液中加入10ul RnaseA (10mg/ml)，吹打混勻，室溫靜置5min。

5. 向細胞裂解液中加入600ul buffer PC，顛倒混勻數次。

6. 在漩渦混勻器上震蕩磁珠20s，使其均勻懸浮。向反應混合物中加入50ul MagBeads，渦旋混勻10s。室溫靜置3min。將離心管插入磁力架，磁性分離。棄上清。

7. 將離心管取下，加入800ul buffer WB1。渦旋混勻10s。將離心管插入磁力架，磁性分離。棄上清。

8. 將離心管取下，加入800ul buffer WB2。渦旋混勻10s。將離心管插入磁力架，磁性分離。棄上清。

9. 將離心管在磁力架上開蓋靜置5-10min，使管內液體完全揮發?？捎脴岊^吸棄管底、管壁殘留的液滴。

10. 將離心管取下，加入50ul buffer EL。用槍頭攪拌成團的磁珠，吹打混勻數次，將磁珠完全打散。60℃水浴洗脫5min。

11. 將離心管插入磁力架，磁性分離。小心將上清吸取到新的EP管中，勿吸入磁珠。上清即為口腔拭子基因組DNA。